克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖,以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群。通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因的个体或种群。
一、在自然界,有不少植物生来就具有克隆本能,如番薯、马铃薯、玫瑰等能够进行插枝繁殖的植物。
二、一些无脊椎动物某些鱼类、蜥蜴和青蛙未受精的卵也可以在某些特定环境下,比如受到化学刺激的条件下,成长并发育成完整个体。这一过程也被称为是产卵雌性的克隆。
植物克隆的技术真的存在吗?
1)目的基因制备和分离:一般通过文库筛选、同源序列比对等方法进行克隆。
2)DNA重组载体的构建:选择植物表达载体,根据载体选择或添加酶切位点,然后进行酶切连接,构建重组载体。
3)转化:转化方法有多种:农杆菌法:将重组载体用电击或热激的方法将其转入农杆菌中,再用农杆菌侵染植物;基因枪法:将重组载体与金粉混合后用基因枪轰击组织块;此外还有其他一些方法。
4)植物阳性植株的筛选和鉴定:一般先用抗性初次筛选后,在基因水平上用PCR扩增目的片段或做Southern杂交;在RNA水平上做半定量或Nouthern杂交.
5)基因表达产物的分离纯化和鉴定:这是蛋白水平上的鉴定,一般是提取纯化蛋白,做蛋白分析。
克隆植物的植物克隆技术基本过程
植物克隆不是很常见吗?
所谓的克隆,就是自己不通过有性繁殖,仅仅通过自己造出一个和自己基因完全一样的个体。那么,这样的例子在植物中是非常多的。
比如,红薯就是这样的。红薯可以通过自己的一个枝来繁殖出另一株和自己遗传物质一样的个体,这就是植物的一种克隆。
另一个常见的例子是树的扦插技术,我们常说“有心栽花花不开,无心插柳柳成荫”就是说的柳树扦插。其他的杨树,榆树也同样如此。这也是一种植物的克隆。
所以,在植物中,克隆技术是很常见的,甚至不依赖人的技术,植物本身都是可以克隆自己的。
1、 母液的配制和保存
为减少工作量一般将各种成分配成比所需浓度高10-100倍的母液,用时按比例稀释。在配制大量元素无机盐母液时,要防止在混合各种盐类时产生沉淀,为此各种药品必须在充分溶解后才能混合,同时在混合时要注意先后顺序,把钙离子、锰离子、钡离子和硫酸根、磷酸根错开,以免发生作用,相互结合生成沉淀。另外在混合各种无机盐时,稀释度要大,慢慢混合,同时边混合边搅拌。
配制好的母液分别贴好标签,注明母液号、配制倍数、日期及配制1L培养基时应取的量。母液储存于2-4℃的冰箱中。
2、 培养基的配制
(1) 称取规定数量的琼脂和蔗糖,加入一定量的蒸馏水,加热使其溶解。
(2) 在烧杯中加入规定量的各种母液,包括生长调节物质和其他的特殊补加物。
(3) 将母液混合物加入融化的琼脂中,再加入糖类物质,定容至所需体积,搅匀。
(4) 用1mol/L的氢氧化钠和盐酸调节pH值。
(5) 趁热将培养基分装到所选用的培养容器中。
(6) 用棉塞或封口膜盖住瓶口。
(7) 在121-126℃灭菌15-20min。
(8) 灭菌后,待压力归零后将培养基取出让其凝固。 1、 材料的选择和确定
不同种类的植物以及同种植物不同的器官对诱导条件的反应是不一致的,因此,在取材时要充分考虑季节的影响、器官的生理状态和发育年龄、取材的部位以及材料的大小。
2、 材料的消毒
一般材料先用自来水冲洗,再用70%的酒精浸泡数秒,倒去酒精,再用0.1%的升汞溶液或2-10%的次氯酸钠溶液浸泡10-15min,后用无菌水冲洗3-5次。
3、 接种
将材料切成所需的形状和大小,接入培养基中。 1、 初代培养
在初代培养基上,外植体经不同的途径可以诱导出愈伤组织、直接分化出芽或诱导出胚状体。
2、 继代培养
将初代培养产物转入继代培养基上,使愈伤组织分化出丛生芽、不定芽继续增殖、胚状体发育成完整植株。
3、 生根
将健壮的试管苗插入生根培养基中,诱导根的形成。
4、 试管苗的移栽
打开瓶盖,逐渐降低湿度,并逐渐增强光照,进行驯化,以适应环境,经过一段时间的炼苗即可移入盆中。
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本文概览:克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖,以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群。通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因的个体或种群。一、在自然界...
文章不错《哪些植物和低等生物可以克隆》内容很有帮助